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DeltaVision高分辨率活细胞成像系统

    DeltaVision高分辨率活细胞成像系统是用于活细胞长时间、高清晰度、高灵敏度成像的设备。当用活细胞染料标记细胞内特定生物大分子,或者使用荧光蛋白标记体内特定蛋白时,使用该荧光染料或者荧光分子特定的激发光线激发,通过探测其特用的发射光线即可探测到该生物大分子。活细胞成像系统一方面控制细胞生存的外部环境,提供合适的温度、适度和pH,让细胞处于最佳状态。另外一方面通过高灵敏度CCD捕捉细胞中的微弱荧光,长时间观察细胞中的荧光分子的运动,具体揭示细胞间或细胞内生物大分子的变化过程。



主要功能为:

1.多维成像

    目前可以做到六维(XYZ三维,时间,不同点,不同波长)成像。通过光学切片(optical section)技术,实现对样品的3D观察,构建样品的立体结构。

上面是经过3D重建的肿瘤细胞:A为正面,B为旋转30度后,C为旋转90度后。


2.3D还原型反卷积处理

    显微镜的分辨率和图像的对比度取决于物镜收集的光学信息。显微镜光路中衍射和折射现象的存在,使得样品信号的位置和强度都发生了变化,降低了系统的分辨率和图像的质量。API作为对图像数据进行反卷积处理最早的实践者,将显微镜的硬件设计和后期软件处理完美的结合在一起,通过对光学信号的3D还原型反卷积处理,大大提高了显微镜的灵敏度和分辨率。

 原始图像和经过3D反卷积处理后图像的对比:A,B为处理前,C,D为处理后。

经过反卷积处理后,信号的强度和图像对比度得到很大提升。


3.延时摄影

    通过软件精确的控制,拍摄的时间间隔从数秒到数小时不等,在长时间拍摄下也不会造成荧光信号的淬灭。根据实验需求的不同,无论单一层面还是三维结构,都可以获得良好的效果。

正在分裂的Hela细胞,其中绿色标记微管蛋白,红色标记染色体


4.高速离子成像

    结合高速CCD和高效的光路,在512×512像素下仍然可以实现21帧/秒的成像速度。对于快速的离子浓度的变化,最快可以50-100帧/秒的速度获取图像。

细胞间钙信号的传递。使用Fluo-4标记胞内的钙离子,并给予荧光信号对钙离子的强度进行成像


5.荧光共定位分析

    通过比较多个荧光通道的定位情况,即可知道他们在空间上和时间上的分布信息,进而得到相应的荧光信号是否存在相互作用、协同运动、定向运输等。


    体外重组的病毒颗粒侵染细胞,绿色标记病毒的壳蛋白,红色标记病毒的RNA结合蛋白。病毒入侵前,由于病毒颗粒完整,绿色信号和红色信号共定位。病毒入侵细胞后,脱掉表面的壳蛋白,绿色信号和红色信号分离。



6.荧光共振能量转移(FRET)
    DeltaVision特制的活细胞滤片组保证CFP/YFP,GFP/mCherry(RFP)荧光强度的精确记录,并进一步计算出蛋白对之间精确的能量转移系数。

计算不同荧光通道荧光信号的强度,进一步可得到能量转移系数。


主要应用领域:

1) 细胞迁移与细胞骨架;
2) 细胞与细胞相互作用
3) 细胞分裂与细胞周期;
4) 细胞信号转导;
5) 组织分化与发育;
6) 囊泡和蛋白运输;
7) 生理学和神经科学;
8) 钙离子信号研究;
9) 宿主与病原体相互作用;
10) 药理研究;
1. DeltaVision使用最优秀的物镜
2. NanoMotion III高精准载物台
3. 专利的InsightSSI固态光源
4. DeltaVision独有的稳态均一照射系统
5. 专利的还原型去卷积技术
6. 高速、高灵敏度的制冷CCD
7. UltimateFocus自动对焦系统
8. 多点拍摄、细胞跟踪



主题:DeltaVision高分辨率活细胞成像系统
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